pcr技术怎样检测目的基因是否转录
PCR（聚合酶链式反应）技术可以用于检测目的基因是否转录。具体步骤如下：
1. RNA提取：首先需要从待检测的样品中提取RNA，这可以通过商业RNA提取试剂盒或其他方法完成。
2. cDNA合成：将RNA作为模板，使用反转录酶（Reverse Transcriptase）逆转录成为cDNA（互补DNA），即将RNA转化为DNA。这可以通过商业的逆转录酶和随附的试剂盒来完成。
3. PCR扩增：使用特异性引物（primers）将目标基因的cDNA扩增，一般选择外显子区域作为引物靶点，这样才能避免检测到不完整的信使RNA。PCR扩增过程中，如果目的基因在细胞内有转录，cDNA会被扩增出来。
4. 凝胶电泳：将PCR扩增产物进行凝胶电泳，观察是否有预期大小的DNA条带产生。如果PCR扩增后有预期大小的基因产物，则说明该基因在待检样品中已经转录。
为什么跑PCR要用CDNA，而不用本身的DNA
你做的是不是RT-PCR， 这个就是以反转录得到的cDNA为模板的。
我们做的时候一般是提取植物总的RNA，然后采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，主要是获得目的基因或检测基因表达，判断目的基因mRNA转录水平的相对量的变化。因为直接提取DNA的话，并不能证明该基因在其他细胞体内进行表达，通过这种方法可以克服假阳性。仅供参考。
逆转录pcr详细步骤
逆转录PCR是在实验室进行的一种分子生物学技术，其详细步骤如下：1. 将转录酶、RNA模板、引物和反应缓冲液混合，生成反应体系。
2. 在反应体系中加入逆转录酶，使RNA模板转录成cDNA。
3. 在反应结束后，加入热稳定DNA聚合酶、引物和反应缓冲液，生成PCR反应体系。
4. 在反应体系中进行PCR扩增，得到所需的DNA产物。
逆转录PCR是一种将RNA模板逆转录为cDNA，并通过PCR扩增DNA的技术，其主要用于检测基因的表达水平。
同时，逆转录PCR也可以用于病毒等抗原的检测，具有很高的敏感性和特异性。
到此，以上就是小编对于反转录得到的cdna怎么检测的问题就介绍到这了，希望介绍的3点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。
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