DNA提取中为什么加TE缓冲液
TE缓冲液是弱碱性,对DNA的碱基有保护性,(DNA在它是的稳定性较好,不易破坏其完整性或产生开环及断裂),包括提取好的DNA也要放在TE缓冲液是保存.
TE缓冲液如何稀释成低浓度
配制方法:量取下列溶液于500ml烧杯中
1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml
0.5M EDTA PH=8.0 1ml
向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合;将溶液定容到500ml后,高温高压灭菌;室温保存.
1×TE Buffer
组成浓度:10mMTris-HCl1mM EDTA PH=8.0
配制量:500ml
dns溶解时为何要用te缓冲液
在基因操作实验中,选择缓冲液的主要原则是考虑DNA的稳定性及缓冲液成分不产生干扰作用。
磷酸盐缓冲系统(pKa=7.2)和硼酸系统(pKa=9.24)等虽然也都符合细胞内环境的生理范围(pH),可作DNA的保存液,但在转化实验时,磷酸根离子的种类及数量将与Ca2+产生Ca3(PO4)2沉淀,在DNA反应时,不同的酶对辅助因子的种类及数量要求不同,有的要求高离子浓度,有的则要求低盐浓度,采用Tris-HCl(pKa=8.0)的缓冲系统,由于缓冲液是TrisH+/Tris,不存在金属离子的干扰作用,故在提取或保存DNA时,大都采用Tris-HCl系统,而TE缓冲液中的EDTA更能稳定 。
oligo多少度储存
Oligo是通过紫外分光光度计在260nm波长下定量的,因此必须在配置引物溶液前,详细参考报告单中每条Oligo的分子量、OD数、每OD的nmol数、Tm值等参数,计算出相应量后才能配置。比如若您要溶解多少umol的溶液,应该加入多少ml的ddH2O或TE充分溶解。
经过真空干燥的Oligo呈薄膜状或粉末状附在离心管内壁上,使用时,请将引物离心数秒,使 DNA 聚集到管底。小心开启管盖,以免引起粉末丢失。再加入适量ddH2O或TE缓冲液,盖好管盖,涡旋振荡混匀使其充分溶解。
使用过程中,请尽量减少Oligo溶液的冻融次数,以降低Oligo在冻融过程中的降解量。
请把 Oligo 产品放置在-20℃保存,干粉引物至少可以稳定保存1年,引物溶液可以稳定保存6个月以上。
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