浓缩胶ph低会怎么样（浓缩胶ph高了会怎么样）

1. 浓缩胶的作用原理
2. 分离胶与浓缩胶的成分区别
3. western blot配胶没有凝固是什么情况

浓缩胶的作用原理

浓缩胶是在不连续聚丙烯 酰胺凝胶电泳中，同一介质的凝胶浓度分为 两种，负极的加样侧一般浓度为2%〜5%， 称为浓缩胶，其余部分浓度为6%〜8%， 称为分离胶。

由于浓缩胶浓度低、孔径大， 而分离胶浓度高、孔径小。

带电荷的蛋白质 或核酸离子在大孔径胶中移动时阻力小，移动速度快，当接近小孔径的分离胶时，遇到的阻力大，移动速度减慢而使样品浓缩，形 成一条狭窄区带，以减少电泳过程中的谱 带扩散。

浓缩胶与分离胶的pH值不同也呵 以强化样品的浓缩作用。

浓缩胶的作用是有堆积作用，凝胶浓度较小，孔径较大，把较稀的样品加在浓缩胶上，经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。

分离胶与浓缩胶的成分区别

1、性质不同

浓缩胶：在不连续聚丙烯 酰胺凝胶电泳中，同一介质的凝胶浓度分为 两种，负极的加样侧一般浓度为2%〜5%。

分离胶：不连续缓冲体系聚丙烯酰胺凝胶电泳中的一部分，其组成、缓冲液pH和凝胶孔径与浓缩凝胶不同。它具有分子筛效应的小孔径凝胶。

2、过程不同

浓缩胶过程：由于浓缩胶浓度低、孔径大，分离胶浓度高，孔径小。带电蛋白质或核酸离子在大孔径凝胶中运动时，阻力小，运动速度快。当接近小孔径凝胶时，阻力较大，移动速度减慢，使样品浓缩，形成窄带，减少电泳过程中的带扩散。

western blot配胶没有凝固是什么情况

1，复查一遍浓缩胶，分离胶各buffer的组分是否配制有误，特别是pH，现在气温上升，原来冬天配制的溶液的pH和现在可能会相差很多，建议复查，如果pH不对，重新配过。一般情况下，对于pH有要求的溶液，季节更换的时候，基本要重新配过的。原来以贮存液形式存在的溶液，在稀释用作工作液的时候，也要特别注意pH

2，多加过硫酸铵试试，确认是否失效，AP最好是现用现配，至少要放在4℃保存，一周之后也必须新配

3，多加点TEMED，可加速凝固，加二倍量试

4，配好胶后放在温箱里凝的快些。也许你在空调房里做胶温度比较低。

一般是该加的试剂错加或者漏加，尤其是促凝相关的APS或者TEMED

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