65%硫酸铵怎么配制
饱和硫酸铵配制方法可加入过量的硫酸铵,热至50~60℃保温数分钟,趁热滤去沉淀,再在0℃或25℃下平衡1~2天,有固体析出时即达100%饱和度.
3克硫酸铵怎么配制饱和溶液
往水里面加硫酸铵3克,直到硫酸铵不溶解为止!溶液中要有少量硫酸铵固体!
25℃下100%硫酸铵是1L水中约加780g硫酸铵。可以在加进去之后,用微波炉加热到溶解为止,然后放置在过夜,第二天就会有晶体析出,这就可以了。双蒸水中加入过量硫酸铵,热至50-60度保温数分钟,趁热滤出沉淀,在0度或25度平衡1-2天,有固体析出时即达100%饱和度,以氨水调节PH值至7.0。
5%海藻糖溶液怎么配
(1)将热带假丝酵母接种于发酵培养基中,在温度28℃的条件下,培养70h,制得发酵液;上述发酵培养基组分如下,均为重量百分比:麦芽糖3%,蛋白胨0.6%,牛肉膏0.4%,KH2PO40.1%,MgSO4•7H2O0.06%;余量水,pH6.0;
(2)将步骤(1)制得的发酵液在4℃条件下进行6000r/min冷冻离心20min,收 集湿菌体,用浓度1mol/L的磷酸钠缓冲液悬浮菌体,制成菌悬液,再采用高压均质机, 在温度为4℃,破碎压强为140Mpa的条件下,进行菌体的破碎,4℃条件下6000r/min 冷冻离心10min后,收集所得的上清液即为粗酶液;
在搅拌状态下,将固体硫酸铵粉末加入粗酶液中至浓度达到25℃条件下硫酸铵饱和度的30%,离心后取上清液,制得的海藻糖合成酶液的酶活为54U/g湿菌体;
(3)在戊二醛质量浓度为0.5%,海藻糖合成酶液与壳聚糖凝胶的体积质量比为6:1、 pH8.0、温度15℃的条件下,体积质量比单位为ml/g,进行交联包埋反应13h,制得固定化海藻糖合成酶;
(4)配制质量浓度10%的麦芽糖溶液,调节pH7.8,制得麦芽糖底物溶液;
硫酸铵脱灰原理
抗体的纯化 ( 硫酸铵沉淀法)
一, 基本原理
硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质。用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离,是免疫球蛋白分离的常用方法。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子,从而破坏蛋白质表面的水化膜,降低其溶解度,使之从溶液中沉淀出来。各种蛋白质的溶解度不同,因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。这种方法称之为盐析。盐浓度通常用饱和度来表示。硫酸铵因其溶解度大,温度系数小和不易使蛋白质变性而应用最广。
50%饱和硫酸铵用来沉淀什么
沉淀血清中的球蛋白。
硫酸胺一般才采用分级沉淀法,先从小浓度开始,在逐渐加大浓度,直到将硫酸铵浓度调至50%,基本上就达到沉淀所需蛋白的目的了
首先用50%饱和硫酸铵沉淀,过夜后离心去上清,再用33%饱和硫酸铵沉淀,过夜后离心去上清,将沉淀溶于尽量少的生理盐水或PBS中,用生理盐水或PBS透析除盐即可。
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