什么原因酚红配制的培养基
酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色.研究表明,酚红可以模拟 固醇类激素的作用,(特别是雌激素).为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基.由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细 胞检测时,不使用加有酚红的培养基.
gkn溶液怎么配
GKN溶液的配制是:NaCl 8g,KCl 0.4g,Na2HPO4·2H2O 1.77g,NaH2PO4.H2O 0.69g,葡萄糖 2g,酚红 0.01g,溶于1000ml双蒸水中。
首先应该可以为细胞提供一个合适的缓冲环境,细胞在体外很脆弱的,对于任何的介质变化、机械损伤都极为敏感;同时,葡萄糖的存在也起着调节渗透压的作用吧,细胞要保持形态和功能活性,渗透压的稳定是很重要的。记得在血球计数的时候也用过GKN来调整细胞数的。
据记忆 PEG分子应该是带有轻微负极性的,可以与正极性基团的水、Pr、糖类等形成氢键,从而在质膜之间形成分子桥,使得质膜发生粘连促使质膜的融合。我不是学化学的,具体价键理论、反应机理都不很清楚;但我认为PEG发生这一系列反应也是需要一定盐浓度的。
简而言之就两个方面,pH和渗透压。看看成分也差不多,酚红用来指示保持在生理pH。
MTT溶液的配制方法是什么
通常,此法中的MTT 浓度为5mg/ml。因此,可以称取MTT 0.5克,溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。
需要注意的是,MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候,为了保证实验结果的线性,MTT 吸光度最好在0-0.7 范围内。
MTT一般最好现用现配,过滤后4℃避光保存两周内有效,或配制成5mg/ml保存在-20度长期保存,避免反复冻融,最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分装在EP管里,用的时候现配,直接往培养板中加,没必要一下子配那么多,尤其当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用了。
MTT有致癌性,用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套.配成的MTT需要无菌,MTT对菌很敏感;往96孔板加时不避光也没有关系,毕竟时间较短,或者你不放心的时候可以把操作台上的照明灯关掉.
酚红和酚酞是不是一样的
酚酞和酚红是有一定区别的,具体分析如下。
1、酚酞
酚酞指示剂是指一种化学成品,属于晶体粉末状,几乎不溶于水,易溶于酒精,因此通常把酚酞配制成酒精溶液使用。酚酞除了用作碱指示剂、非水溶液滴定用指示剂、色层分析用试剂,还可以用作有机合成原料和医药原料。其特性是在酸性和中性溶液中为无色,在碱性溶液中为紫红色。常被用来检测酸碱。酚酞pH值范围在8.2-10.0,颜色由无色至红色。
2、酚红
酚红是一种深红色结晶性粉末,微溶于水。酚红主要用作酸碱指标剂。酚红在低pH值时呈现黄色,在高pH值时呈现红色,但在pH值6.6至8.0间会呈现橙色。酚红较偏酸,变色pH值范围为6.8-8.0,由黄到红。
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