纯化胆盐是什么
是肝细胞分泌的胆汁酸和甘氨酸结合形成的钠盐或者钾盐
胆盐(Bile salt)是由肝细胞分泌的胆汁酸与甘氨酸或牛磺酸结合而形成的钠盐或钾盐。它是胆汁中参与脂肪消化和吸收的主要成分。胆盐随肝胆汁排至小肠后,约有95%在回肠末端被吸收入血,经门静脉进入肝脏再合成胆汁,而后又被排入肠内,这个过程称为胆盐的肠-肝循环。
纯化胆盐是由肝细胞分泌的胆汁酸与甘氨酸或牛磺酸结合而形成的钠盐或钾盐,为白色或淡黄色粉末,是细菌培养基中常用的选择性抑制剂。
它由动物胆汁中提取。实验室常用胆盐类产品有:牛胆盐、猪胆盐、三号胆盐、五号胆盐、七号胆盐、脱氧胆酸钠、牛胆酸钠等。
胆汁酸的合成途径是什么
促进胆汁酸肠肝循环的动力是肝细胞的转运系统---吸收胆汁酸并将其分泌入胆汁、缩胆囊素诱导的胆囊收缩、小肠的推进蠕动,回肠黏膜的主动运输及血液向门静脉的流入。
在动物医学界很多专家对此进行研究,研究发现胆汁酸在动物机体内乳化脂肪扩大与脂肪酶的接触面积;调控胰脂肪酶和脂蛋白酯酶的活性提高其对脂肪的水解代谢;在肠道内转运脂肪,促进脂肪的吸收。另外,胆汁酸通过调控激素敏感脂肪酶的活性,明显减少了自体脂肪的分解代谢。综上所述,胆汁酸能够节约能量原料,提高能量利用率,改善生长性能及屠宰性能,是节约资源的“正能量”。
胆汁酸按其来源可分为初级胆汁酸和次级胆汁酸两类。在肝细胞以胆固醇为原料直接合成的胆汁酸称为初级胆汁酸,包括胆酸、鹅脱氧胆酸及其与甘氨酸或牛磺酸的结合产物。
次级胆汁酸是初级胆汁酸分泌到肠道中,在肠道细菌作用下,进行 7α 脱羟作用所形成的胆汁酸,主要包括脱氧胆酸和石胆酸及其在肝中分别与甘氨酸或牛磺酸结合生成的结合产物。
WB实验时,细胞裂解液如何配置
细胞裂解液的配置可以根据实验的要求和细胞类型的特点进行调整。一般情况下,细胞裂解液的配方包括以下组分:
1. 缓冲液:根据实验需要选择不同的缓冲液,如PBS(磷酸盐缓冲液)、Tris-HCl缓冲液等,以维持适宜的pH。
2. 高渗液:高渗液用于破坏细胞膜,促进细胞裂解释放细胞器、蛋白质等组分。常用的高渗液有含有氯化钠、甘油、EDTA等。
3. 螯合剂和酶抑制剂:螯合剂如EDTA可作用于金属离子,防止金属离子诱导的酶活性。酶抑制剂用于抑制特定的酶活性,保护目标蛋白或其他分子的完整性。
4. 特定试剂:根据实验需要可以加入特定试剂,如表观修饰抑制剂、DNA酶、RNA酶等。
细胞裂解液的配方和浓度需要根据实验要求进行优化和确定,可以参考相关文献或生产商提供的相关信息。
组织裂解液(全细胞蛋提取):
1:Tris-HCL 50mmoL/L PH 7.4
2:Nacl 150 mmoL/L
3:去氧胆酸钠 0.25%
4:NP-40或Triton-x-100 1%
5:EDTA 1 mmoL/L
6:PMSF 1 mmoL/L
7:Aprotinin 1μg/ml
8:leupeptin 1μg/ml
9:pepstain 1μg/ml
熊去氧胆酸的原料
熊去氧胆酸的天然原料是熊胆,但是熊的胆汁很少,现多用来源较丰富的牛、羊的胆酸或鹅去氧胆酸为原料,半合成制备。
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