TMB显色反应怎么终止（5-羟吲哚乙酸检测试剂干嘛用的）

1. TAT原理
2. 5-羟吲哚乙酸检测试剂干嘛用的
3. 试剂避光的原理，我们经常说避光，到底避的是什么光？紫外线吗

TAT原理

TAT检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被凝血酶抗凝血酶复合物（TAT）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的凝血酶抗凝血酶复合物（TAT）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

5-羟吲哚乙酸检测试剂干嘛用的

5-羟吲哚乙酸检测试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中5-HIAA浓度。 该试剂盒采用竞争ELISA法，用5-HIAA抗原包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的5-HIAA与包被的5-HIAA竞争生物素标记的抗5-HIAA单抗上的结合位点，游离的成分被洗去。

加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。

加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。

试剂避光的原理，我们经常说避光，到底避的是什么光？紫外线吗

　其实这个主要是看显色的时候用的是什么底物了，OPD的话要避光，因为这种底物受光照后会自行变色，如果用TMB底物的话，就没这么严格了， 其他的步骤中像抗原绑定、洗涤之类也都不用避光的，只有在做完二抗洗涤完上酶显色底物的时候。因为大部分的底物对光敏感的，见光会分解，所以要求避光操作。当显色完成后（显色时间是比较短的，需要预先摸索好）加入显色终止液后溶液颜色会在几个礼拜之内保持稳定，也不用再避光了。　　其他反应步骤加盖封板膜的作用不是避光，而是防止反应过程中有异物落入板孔，从而对检测结果造成影响，同时加盖封板膜还能减少液体的蒸发，保持反应体系的均衡，保证检测结果的准确性。

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