固化染色剂配方
1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液
A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精 毫升
B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水 100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液
A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精 10.O 毫升
B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水 95 毫升
将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。将两者混合即成。
迪夫染色液使用步骤
1.涂片:在洁净无油腻的玻片中央放一小滴蒸馏水(或用接种环挑1-2滴水),用无菌的接种环挑取少量菌种与水滴充分混匀,涂成很薄的菌膜,涂布面积约1cm2 。
2.干燥:涂片在室温下使其自然干燥,也可以小心地在酒精灯上高处微微加热,使水分蒸发,但切勿紧靠火焰或加热时间过长,以防标本烤枯而变形。
3.固定:手执玻片一端,有菌膜的一面朝上,通过微火三次(手指触摸反面不烫手为宜),待玻片冷却后,再加染色液。
4.染色:玻片置于玻片搁架上,加适量(以盖满菌膜为度)草酸铵结晶紫(或石炭酸复红染液)于菌膜部位,染色1-2min。
5.水洗:斜置载玻片,在自来水龙头(或洗瓶)下用小股水流冲洗,直至洗下的水呈无色为止。
6.干燥:自然干燥或用吸水纸吸去涂片上的水,用吸水纸时切勿将菌体擦掉。
7.镜检:用高倍镜和油镜观察并绘细菌形态并绘图于记录表中。
荚膜染色法的主要类型有:黑斯荚膜染色法、密尔荚膜染色法、奥尔特荚膜染色法、湿墨水负染法、干墨水负染法、石炭酸复红液染色法、
弱抗酸染色步骤和原理
原理:抗酸杆菌的主要特点是细胞壁含有大量类脂,一般不容易着色,但经加温或延长染色时间着色后,能抵抗酸性乙醇的脱色。而非抗酸菌则不具此特性,染色后容易被盐酸酒精脱色。
2、步骤:涂片、干燥,固定。
初染:滴加石炭酸复红液于涂片上,染色10分钟或蒸染5分钟后,水洗。
脱色:滴加3%盐酸酒精,脱色时频频倾动玻片,直至无明显颜色脱出为止,水冲洗。
复染:滴加碱性美蓝液复染1分钟后,水冲洗,干燥,显微镜观察。
3、结果:抗酸菌被染成红色,细胞及其他细菌被染成兰色
弱抗酸染色是一种常用的组织学染色方法,用于观察细胞和组织的形态结构。其步骤包括:将组织样本经过固定、脱水和透明化处理后,再经过石蜡包埋,切片后,将切片放置在热盛若丹明G染色液中,然后轻微后冲洗干净,接着用1%酒精酸进行酸解,最后进行脱水、透明化和封片。
该染色方法的原理是若丹明G是阴离子染料,在酸性条件下,能与细胞核酸结合成为粘附染色,用于显示细胞基质的分布情况,从而观察组织结构与细胞变化。
弱抗酸染色能够提供组织细胞的基本形态特征,有助于病理学检查和研究。
如下:步骤:1. 前处理:将标本进行固定,通常使用甲醛进行固定处理,并去除可能存在的脂肪和血液。
2. 脱水:将标本脱水,常用醇类进行逐渐浓度递增的脱水处理,以去除标本中的水分。
3. 渗透:将标本浸入熔点较高的可溶解剂中,使组织透明化,便于观察和病理诊断。
4. 染色:将标本进行染色,使用弱酸性染料如苏木素、伊红等,将细胞和组织结构染色出色。
5. 清洗和脱水:将标本从染色溶液中清洗,同时进行逐渐浓度递减的醇类脱水处理。
6. 固定:将标本进行固定处理,使用亲水性树脂对其进行固定,使染色物质固定在组织内。
原理:弱抗酸染色是一种酸性染色方法,它是利用酸对细胞和组织的成分进行染色。
弱抗酸染色的原理是,酸性染料能与碱性组分结合,通过与组织中不同成分的特异亲和性,将其染色出颜色,从而突出细胞和组织的形态特征。
此方法适用于某些细胞器如细胞核、线粒体等的染色,能够使细胞和组织部分结构显现出来,方便研究和诊断。
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