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dab和aec显色液使用方法,链霉亲和素hrp使用

豆角 2025-06-25 化学常识 7 views 0

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  1. dab和aec显色液使用方法
  2. tpa操作流程

dab和aec显色液使用方法

DAB染色液用于免疫组化染色,应用在Dako 自动染色系统上。

DAB染色液的使用方法

dab和aec显色液使用方法,链霉亲和素hrp使用

1.DAB显色液配制

10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基联苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,显色时加入5-10mL 30%H2O2 混匀后立即使用

2. 显色

准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。

dab和aec显色液使用方法,链霉亲和素hrp使用

tpa操作流程

1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。

3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。

4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。

dab和aec显色液使用方法,链霉亲和素hrp使用

5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。

7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。

8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9)在450nm波长处测定各孔的OD值。

到此,以上就是小编对于链霉亲和素hrp使用的问题就介绍到这了,希望介绍的2点解答对大家有用,有任何问题和不懂的,欢迎各位老师在评论区讨论,给我留言。

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