tris缓冲溶液存放条件
1、 缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.1,常配成pH值为6.8,7.4,8.0,8.8。
2、温度效应大,温度变化对缓冲液pH值的影响很大,△pKa/℃=-0.031,一般温度每升高一度,PH值下降0.03。例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,室温时pH=7.8,37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃;4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。在pH7.5以下,其缓冲能力极为不理想。
3、 易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封;
4、此缓冲液对某些pH电极发生一定干扰作用,所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。
5、它可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑制作用。
三羟甲基氨基甲烷Tris
需放置在阴凉干燥防潮的库房,常温保存即可
1mmedta溶液的配制
首先是1M Tris-HCl (pH 8.0)母液。
① 称取121.1 g Tris-Base,加入700 ml双蒸水,放置转子,旋转混合溶解。
② pH计校准:从4 ℃冰箱取出pH6.86、pH9.18的电极缓冲液,将pH9.18的电极缓冲液倒出50 ml使用,剩余放入4 ℃冰箱。将电极缓冲液温度调节至25 ℃±0.2 ℃,然后按照pH6.86、pH9.18的顺序对pH计进行校准。
③ Tris-Base完全溶解后,,然后加入浓盐酸进行酸度调节(加入浓盐酸后温度会升高),调至接近目的pH时,观察温度变化并用加热(水浴,微波)或冰浴的方法调节温度至25 ℃±0.2 ℃,使温度在25 ℃±0.2 ℃时刚好达到所需pH值(pH值允许误差±0.01)。
④ pH值调节完毕后,用容量瓶定容至1 L,0.45μm滤膜过滤,倒入试剂瓶中保存,标记好日期和名称。
⑤ 配1 L pH8.0的Tris,约需要42 ml浓盐酸。
tris缓冲液可以保存多久
Tris缓冲液是一种常用的实验室缓冲液,通常用于调节pH值。其保存时间可以根据制备方法和储存条件而有所不同。通常来说,正确密封的Tris缓冲液可以在4℃储存3-6个月。然而,为了保持最佳效果,建议最好在制备后的24小时内使用。长时间储存可能导致pH值的变化,影响其缓冲能力。因此,在使用时,最好检查其外观和pH值。
如果有异常,如颜色变化或pH值超出所需范围,则应丢弃并重新制备新的Tris缓冲液,以确保实验的准确性和可靠性。
tris缓冲液可以保存一个月甚至更长时间
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