细菌总RNA提取时,含有溶菌酶的TE缓冲液怎么配制?资料上说DEPC不能处理含Tris的试剂~~~~
溶菌酶比较稳定的,酸碱耐受性都挺好,所以直接用TE溶解就可以了,配成20mg/ml的储存浓度,使用的时候终浓度1-2mg/ml就行了。
tris直接用DEPC水配就可以了。
rna在低温可以保存多久
RNA在4℃过夜或-20℃保存至少1 年而免于降解。RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择。需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA,或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot。
用RNA长期保存液溶解RNA沉淀:
1. 对固体RNA 沉淀,每0.4-4μg RNA 沉淀加入1μl RNA 长期保存液,反复吹打混匀或者室温振荡15-30 分钟溶解沉淀。干燥的RNA 沉淀难以溶解,可反复吹打混匀后50℃加热10-15 分钟。最好先用小体积无RNase 的TE 或水溶解RNA沉淀,然后按液态RNA 操作。
2. 对液态RNA 溶液,每0.4-4μg RNA 溶液加入1μl RNA 长期保存液,混匀。注意混合液中RNA 长期保存液的体积百分比不低于80%。
3. 测定OD 值。注意加入相应量的RNA 长期保存液做空白。
4. 将溶解的RNA 样品储存于-20℃或者-70 ºC。
从RNA长期保存液中沉淀RNA:
1. 估计RNA 溶液终体积。加入4 倍体积的无水乙醇,混匀。如果溶液体积过小操作不便,可加入RNase free water 稀释RNA 溶液,如果溶液中RNA 含量低于
TE缓冲液的配制方法
TE缓冲液是由Tris和EDTA配制而成,主要用于溶解核酸,能稳定储存DNA和RNA。
TE缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。
PH缓冲系统对维持生物的正常pH值,正常生理环境起重要作用。
多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动,而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。
在生物体中有三种主要的pH缓冲体系,它们是蛋白质、重碳酸盐缓冲体系和磷酸盐缓冲体系。
每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的。
rna引物怎么保存
引物最好的保存方法是-20度保存干粉,另外溶解-20保存了五年也没有问题。我觉得还取决于引物合成的质量。还有合成时最好每管一个OD,用一管融一管,避免反复动容也是,避免引物降解的方法。
在提取RNA过程中进行到加入75%乙醇后,可使RNA沉淀在4度保存一个月,在-20度保存一年。
1、以沉淀的形式保存在无水乙醇中;
2、以溶液的形式冻存在-80冰箱,并且尽量少冻融;
3、按试剂商提供的说法,保存在裂解液中可达2年;一般这种方法用的比较少,因为每次提RNA都是一气下来,中间没有停顿的,除非一次提很多,上午时间不够用,可进行到加入乙醇未知,然后放到-20度冰箱,下午可继续进行。
rnawait和rnalater区别
rnawait指非冻型组织细胞RNA保存液。
rnalater是一种液态的,无毒的组织保存试剂。
到此,以上就是小编对于rna保存液配置的问题就介绍到这了,希望介绍的5点解答对大家有用,有任何问题和不懂的,欢迎各位老师在评论区讨论,给我留言。
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