磷钼酸显色剂怎么配
磷钼酸(PMA)显色剂的配制方法
10 g 磷钼酸+100 mL 乙醇
淡黄色,久置变为浅绿色,不影响使用。浸板或喷板,加热,浅黄色背景,还原性物质显蓝绿色斑点,如果斑点太浓,可能显深黄色。
适用范围
适用于含共轭基团的化合物,芳香化合物。
1.用于蛋白质的颜色反应(福林反应):是Tyr的酚基与磷钼酸和磷钨酸的反应, 呈蓝色,本反应主要用于蛋白质的定量分析。
2.用于木脂素的一些非特征的理化鉴别:5%磷钼酸乙醇液(105度,2-3min) ,可用于薄层层析显色。
显色剂配制
1、硫酸常用配比:
1)5%浓硫酸乙醇或乙酸酐溶液;
2)浓硫酸与甲醇或乙醇等体积混合;
3)15%浓硫酸正丁醇溶液。
2、碘常用配比:
1)0.5%碘的氯仿溶液。
2)碘蒸气:将少许碘晶体放入一密闭的容器内,使之充满饱和碘蒸气,将薄层放入容器片刻或数分钟即显色。有时在容器内放一小杯水增加湿度,可提高显色的灵敏度,可提高显色的灵敏度,在化合物斑点处显黄-棕色。
3、荧光素-溴常用配比:
100 mg荧光素溶于100 mL乙醇中;溴试剂:5%的溴的四氯化碳溶液。
4、硝酸银-氢氧化铵常用配比:
磷钼蓝比色法显色原理
元素磷经苯萃取后,在苯相加入氧化剂,氧化形成的磷钼酸被氯化亚锡还原成蓝色络合物,比色测定。
在酸性介质下,磷酸盐与钼酸铵反应生成磷钼酸铵,因其颜色为黄色,常称为磷钼黄。磷钼黄溶液中加入氯化亚锡,氯化亚锡有还原性,将磷钼黄还系为磷钼蓝,磷钥蓝颜色的深浅程度与磷酸根的浓度成正比,根据颜色深浅度与标准色对比计算得出磷酸根浓度。
在用比色法测定磷酸根浓度时,为避免硅酸根的干扰,要求显示水样酸度在0.6mol/L左右。
edta与磷的化学反应式
edta不是原子是不能与磷发生化学反应的,也不存在化学反应式。磷是原子,元素符号p,是由磷原子和核外电子构成的,磷原子的核外电子数和质量决定磷原子量,磷和其它原子组成化合物才能和其它分子发生化学反应,才能有化学反应方程式。
原理:有机肥料试样采用硫酸和过氧化氢消煮,在一定酸度下,待测液中的磷酸根离子与偏钒酸和钼酸反应形成黄色三元杂多酸。在一定浓度范围内,黄色溶液的吸光度与含磷量呈正比例关系,用分光光度法定量磷。
标准曲线绘制:吸取磷标准溶液0,1.0,2.5,5.0,7.5,10.0,15.0mL分别置于7个50mL容量瓶中,加入与吸取试样溶液等体积的空白溶液,加水至30mL左右,加2滴2,6-二硝基酚指示剂溶液,用氢氧化钠溶液和硫酸溶液调节溶液刚呈微黄色,加10.0mL钒钼酸铵试剂,摇匀,用水定容。此溶液为 1mL含磷(P)0,1.0,2.5,5.0,7.5,10.0,15.0μg的标准溶液系列。在室温下放置20min后,在分光光度计波长440nm处用1cm光径比色皿,以空白溶液调节仪器零点,进行比色,读取吸光度。根据磷浓度和吸光度绘制标准曲线或求出直线回归方程。
测定步骤:吸取经2.3.1.3处理过的消煮液5.00mL-10.00mL试样溶液(含磷0.05mg-1.0mg)于50mL容量瓶中,加水至30mL左右,与标准溶液系列同条件显色、比色,读取吸光度。 另作空白试验。
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