为什么琼脂糖凝胶电泳的条带弯曲,琼脂糖凝胶电泳marker怎么看bp

1. 为什么琼脂糖凝胶电泳的条带弯曲
2. 怎么判断质粒分子量大小
3. 琼脂糖凝胶电泳实验过程
4. 琼脂糖凝胶电泳操作应注意哪些环节

为什么琼脂糖凝胶电泳的条带弯曲

凝胶没化均匀,或者电泳电压过高。

1.条带呈伞状 不管是目的基因的条带还是Marker的条带都呈伞状拖尾出现; 原因分析:电泳液陈旧;琼脂糖凝胶配置出现问题; 解决方法:重新配置电泳缓冲液,并及时更换新的电泳液;配置琼脂糖凝 胶应注意是否正确加入合适的TAE浓缩液,凝固时间应充足,凝胶尽量现配现用,切勿长时间配置后使用。

2.条带偏移扭曲 不管是目的基因的条带还是Marker的条带都呈现弯曲,泳道发生偏移; 问题原因:琼脂糖凝胶配置出现问题;凝胶未完全凝固;凝胶在电泳槽中位置摆放偏移

怎么判断质粒分子量大小

直接用环状的质粒跑电泳是很难判断其分子量的

一般来说要先找到上面的一个相应的酶切位点（这个酶在这个质粒上只有一个识别域）.把质粒完全切开后再跑琼脂糖凝胶电泳,配合适当的marker就可以比较准确的判断质粒的分子量.

有问题一起讨论解决哦~

琼脂糖凝胶电泳实验过程

一、操作步骤：

1、电泳方法

一般的核酸检测只需要琼脂糖凝胶电泳就可以；如果需要分辨率高的电泳，特别是只有几个bp的差别应该选择聚丙烯酰胺凝胶电泳；用普通电泳不合适的巨大DNA链应该使用脉冲凝胶电泳。

2、凝胶浓度

对于琼脂糖凝胶电泳，浓度通常在0.5～2%之间，低浓度的用来进行大片段核酸的电泳，高浓度的用来进行小片段分析。低浓度胶易碎，小心操作和使用质量好的琼脂糖是解决办法。

琼脂糖凝胶电泳操作应注意哪些环节

答：1. 根据片段大小配制不同浓度的胶（改变分辨率），片段越小，需要胶浓度越大。

　　2. 胶要现制先用。

　　3. 选择合适的Marker。

　　4. 配胶的缓冲液与电泳缓冲液要是同一种，且浓度一致（1倍）。

　　5. 点样时要加入loading buffer，并注意，不要将样点到点样孔之外（飘样），也不要将胶戳漏（漏样）。

　　6. 根据片段大小，及电泳检测目的，选择合适的电压及电泳时间。

　　7. EB染色。可选择制胶时加入EB（要在溶玩胶后，且温度至室温时（用手握住制胶容器，不烫手即可））；或电泳结束后，将胶放入EB溶液中染色。

到此，以上就是小编对于琼脂糖凝胶电泳marker怎么看bp的问题就介绍到这了，希望介绍的4点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。