酚氯仿异戊醇分层了怎么办（琼脂糖凝胶电泳时如果提取的DNA中含有蛋白质和RNA污染应如何解决）

1. 氯仿溶于乙醇吗为什么
2. 琼脂糖凝胶电泳时如果提取的DNA中含有蛋白质和RNA污染应如何解决

氯仿溶于乙醇吗为什么

非极性分子,不溶于极性溶剂.但考虑到乙醇的极性弱于水,所以推估氯气在乙醇中溶解度可能略大于水中.但要考虑到氯气可与水发生反应生成次氯酸和hcl（虽然进行的不完全）,

氯气在碱存在的条件下,与乙醇反应,乙醇被氧化为乙醛,并可继续反应生成三氯乙醛和氯仿

氯仿：异戊醇=25:24:1在核酸抽提中用来除去蛋白和脂类物质，分液后水相（pH8.0,其中含核酸）在一定的离子强度下加入乙醇沉淀核酸，其中残留的有机溶剂会被乙醇带走。

酚抽提法得到的核酸质量能胜任大多数的分子生物学操作。在常用核酸分离方法中其核酸纯度仅次于氯化铯梯度离心法获得的核酸，比大多数的离子交换法得到的核酸质量要高。

琼脂糖凝胶电泳时如果提取的DNA中含有蛋白质和RNA污染应如何解决

蛋白污染可以考虑用酚氯仿多抽提几次，记得吸上清的时候小心点，宁可浪费也别吸到界面。一般后续还需要用氯仿/异戊醇抽提来去除酚。这样基本蛋白污染就可以去干净。实在不行，抽提一次后，就用蛋白酶K消化30min，再抽提。 如果DNA多，RNA污染就添加RNase A消化，你可以中途取少量跑胶检测，RNA去干净了再抽提，再沉淀DNA。

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