磷酸钠标准品怎么配（磷酸钠标准品怎么配）

1. dtnb溶液怎么配制

dtnb溶液怎么配制

方法一、试剂的配制：

1、Tris－HCL缓冲液（0.25M）：DDW准确配制后，用盐酸调节pH＝8.3；

2、半胱氨酸标准溶液（1mM）：准确称取0.017563gL－半胱氨酸（175.63），用1ml甲酸溶解，以DDW定容至100ml；

3、DTNB（分子量：396.35）标准溶液（10mM）：准确称取0.198175gDTNB用50mMNa2HPO4（pH＝7.0）配制成50ml溶液，存放于棕色瓶中，于暗处低温保 存备用4、DTNB分析溶液（0.1mM）：由1体积10mMDTNB标准液加99体积0.25M的Tris缓冲液配制而成，现用现配。二、标准曲线的制作;1、25℃条件下，用Tris缓冲液稀释半胱氨酸标准液配成梯度的稀释液（5.0ml）， 其浓度分别为：0.00mM、0.025mM、0.05mM、0.1mM、0.15mM、0.2mM；

2、取上述各浓度溶液1ml分别加入到5ml预先恒温于25℃水中的DTNB分析溶液，摇匀，准确静止10min，立即于波长412nm处测定吸光度值（A）。

根据目的蛋白的吸光度在标准曲线上读出对应的浓度即可

　DTNB比色法

　　原理：DTNB与谷胱甘肽的巯基反应生成黄色的5 -硫代 -2 -硝基苯甲酸，在412 nm波长处有最大吸收峰，而DTNB在400nm以上几乎没有吸收峰。向含有谷胱甘肽的试样中加入少量的DTNB，将反应液在412 nm处测定吸收值，根据吸收值的大小即可求得谷胱甘肽含量。

　　方法步骤：

　　1、DTNB贮存液配制：将0.01 mol/L的DTNB溶解于0.05 mol/L的磷酸缓冲液（pH7.0）中形成DTNB贮存液。

　　2、DTNB分析液配制：将DTNB贮存液用0.5 mol/L、pH8.0的Tris -HCl缓冲液稀释100倍，配成DTNB分析液，避光放置，现配现用。

dtnb溶液的配制方法如下：首先，称取适量的dtnb粉末，加入一定量的有机溶剂（如甲醇或乙醇），并用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。

然后，将溶液过滤，去除杂质。

最后，将溶液调整至所需浓度，即可得到dtnb溶液。需要注意的是，dtnb溶液应在低温下保存，避免光照和氧化。

dtnb溶液配置步骤:

1计算:计算配制所需固体溶质的质量或液体浓溶液的体积。2.称量:用托盘天平称量固体质量或用量筒(应用移液管，但中学阶段一般用量筒)量取液体体积。3.溶解:在烧杯中溶解或稀释溶质，恢复至室温(如不能完全溶解可适当加热)。检查容量瓶是否漏水。

（1）计算：计算配制所需固体溶质的质量或液体浓溶液的体积。

（2）称量：用托盘天平称量固体质量或用量筒（应用移液管，但中学阶段一般用量筒）量取液体体积。

（3）溶解：在烧杯中溶解或稀释溶质，恢复至室温（如不能完全溶解可适当加热）。检查容量瓶是否漏水

要配制dtnb溶液，首先需要准备dtnb固体和溶剂。将适量的dtnb固体称取到容器中，然后加入适量的溶剂（例如甲醇或乙醇），搅拌溶解直至完全溶解。

最后，使用溶液瓶或其他适当的容器储存dtnb溶液，避免光照和高温。注意，配制dtnb溶液时应注意安全操作，佩戴适当的防护设备，并遵循相关实验室操作规范。

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