DAPI染色原理知多少
DAPI(4',6-二氨基-2-苯基吡啶)是一种广泛用于细胞和核酸染色的荧光探针。它具有特异性地与DNA结合,在荧光显微镜下可用于检测细胞核的形态和染色体的分布。
DAPI染色原理如下:
1. 首先,DAPI与DNA发生相互作用。DAPI具有双茎形结构,它的苯环通过亲氢作用和DNA的腺嘌呤碱基进行相互作用。这种相互作用使得DAPI能够与DNA结合并发出荧光信号。
2. DAPI的荧光属性。当DAPI与DNA结合后,DAPI分子的荧光特性会发生变化。DAPI在紫外光(约340-360纳米)照射下,会吸收能量并发出蓝色荧光(约蓝紫色,约约460-480纳米)。
3. 染色样本的处理。为了进行DAPI染色,通常需要将样本固定并透明化,以便DAPI可以更好地渗透到细胞内部。
dapi染色需要打孔吗
不要打孔,会自己穿透的
DAPI 为一种荧光染料,可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用,可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,和EB相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞,荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %) 。DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟,在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。
dapi染死细胞原理
1.原理不同:DAPI染的是双链DNA,PI染的是DNA和RNA。PI可以把细胞浆中的非特异性核酸,比如RNA也染上颜色。所以这个时候可以先用RNA酶处理一下。
2.颜色不同,DAPI在荧光显微镜看到的是紫蓝的光,PI则显示桔红色的光芒。前段时间刚染过,我还是喜欢DAPI的光。
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